原代細胞和傳代細胞培養(yǎng)有含義、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)結果和應用四個方面區(qū)別:
01 / 含義不同
原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程。
傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內,再進行培養(yǎng)的過程。
02 / 培養(yǎng)過程不同
原代培養(yǎng)將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖。培養(yǎng)過程相對復雜,培養(yǎng)條件要求也高,在所有的操作過程中,都須保持培養(yǎng)物及生長環(huán)境的無菌。
傳代培養(yǎng)是在原代細胞基礎上通過胰酶等物質消化后繼續(xù)用于細胞培養(yǎng)的細胞,它與原代細胞具有相同核型。這類細胞在體外可以無.限制分裂。一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,傳代細胞容易增殖。但也要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。
03 / 培養(yǎng)結果不同
原代培養(yǎng)細胞會分裂。原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長就會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。細胞接種后一般幾小時內就能貼壁,并開始生長,如接種的細胞密度適宜,5天到一周即可形成單層。
傳代培養(yǎng)一般傳到40到50代。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2到4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。
04 / 應用不同
原代細胞培養(yǎng)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務于臨床實踐。例如,用從手術中切除的腫瘤細胞進行原代培養(yǎng),然后用該培養(yǎng)細胞進行抗癌藥物的篩選,來幫助選擇有效的化療方案。
傳代培養(yǎng)主要應用在醫(yī)學領域,如口腔醫(yī)學領域重新構建結構復雜的牙根,還有改良羊水細胞培養(yǎng)技術,可多次獲得有效地細胞克隆,大大提高培養(yǎng)成功率,增加了可分析核型數量,提高了產前診斷工作的質量和效益。